低(di)氧(yang)細(xi)胞(bao)微生(sheng)物培(pei)養(yang)箱如(ru)何調控氧氣濃度(du)參(can)數(shu)

 

　　低(di)氧培養(yang)箱的(de)氧(yang)氣濃度(du)調控(kong)基(ji)於(yu)“動態(tai)平衡(heng)”原理(li)，主要(yao)通(tong)過氧氣監(jian)測(ce)-氣體混合(he)-精(jing)準(zhun)補給(gei)的(de)閉(bi)環系統實現。設(she)備內(nei)置(zhi)的氧(yang)氣傳感器(qi)實時監(jian)測(ce)箱內(nei)濃度(du)，當低(di)於(yu)設(she)定(ding)值時(shi)，氮(dan)氣（或(huo)惰性氣體）通(tong)道(dao)自動(dong)開(kai)啟(qi)，稀釋(shi)箱內(nei)氧(yang)氣；若濃度(du)過高，則(ze)通(tong)過微量(liang)空氣補給(gei)模(mo)塊調節(jie)，同時(shi)配(pei)合(he)CO₂濃度(du)控制（通(tong)常維持(chi)5%），確保(bao)培養(yang)環境的穩定(ding)性。不同(tong)實驗(yan)對(dui)象(xiang)對(dui)氧氣濃度(du)需(xu)求(qiu)差異(yi)顯(xian)著(zhu)，例如腫(zhong)瘤(liu)細胞(bao)常需(xu)1%-5%的(de)低(di)氧(yang)環境模(mo)擬(ni)腫(zhong)瘤(liu)微環境，而厭氧(yang)菌培養則(ze)需(xu)將濃度(du)控制在(zai)0.5%以(yi)下，嚴(yan)格(ge)的(de)參(can)數(shu)設(she)定(ding)是(shi)實驗(yan)成(cheng)功的(de)前(qian)提(ti)。

 

　　在參(can)數(shu)設(she)置(zhi)環節(jie)，需(xu)遵(zun)循“分(fen)階(jie)段精準化”原(yuan)則(ze)。首先(xian)根(gen)據培(pei)養(yang)對(dui)象(xiang)確定(ding)目標(biao)濃度(du)，如間(jian)充(chong)質(zhi)幹(gan)細胞(bao)培養(yang)常用2%-3%氧氣濃度(du)，而腸道(dao)厭氧(yang)菌需(xu)低(di)於(yu)0.1%。設(she)置(zhi)時需(xu)註(zhu)意(yi)梯(ti)度(du)調節(jie)，避(bi)免(mian)濃度(du)驟變對(dui)細胞(bao)或(huo)微生(sheng)物造(zao)成(cheng)應激(ji)損傷，例如從(cong)常氧（21%）降至5%時(shi)，建議(yi)以(yi)每(mei)小時(shi)2%-3%的速(su)率逐(zhu)步(bu)下調(tiao)。同(tong)時，需(xu)結(jie)合(he)培(pei)養(yang)周(zhou)期調(tiao)整(zheng)參(can)數(shu)，如(ru)某(mou)些(xie)微生(sheng)物在(zai)對(dui)數(shu)生(sheng)長(chang)期需(xu)適當提(ti)高氧氣濃度(du)至1%-2%，而(er)穩(wen)定(ding)期則(ze)需(xu)維持(chi)0.5%以(yi)下的(de)嚴(yan)格(ge)低(di)氧狀態。此(ci)外，培養(yang)箱的(de)密封性也會(hui)影(ying)響(xiang)參(can)數(shu)穩(wen)定(ding)性，使(shi)用前(qian)需(xu)檢(jian)查(zha)門(men)體(ti)密封條是(shi)否完好(hao)，定(ding)期校(xiao)準氧氣傳感器(qi)（建議(yi)每(mei)3個(ge)月(yue)壹(yi)次(ci)），確保(bao)監(jian)測(ce)數(shu)據的(de)準(zhun)確性。

 

　　實際(ji)操(cao)作(zuo)中(zhong)，還(hai)需(xu)關註環境幹(gan)擾因素(su)的排(pai)除(chu)。培養箱(xiang)周(zhou)圍(wei)應避(bi)免(mian)放(fang)置(zhi)產生(sheng)磁場(chang)的設(she)備，防止幹(gan)擾傳(chuan)感器工(gong)作(zuo)；定(ding)期更(geng)換(huan)箱內(nei)的(de)吸(xi)附劑(ji)，避(bi)免(mian)CO₂和水(shui)蒸氣對(dui)氧氣濃度(du)的間(jian)接(jie)影(ying)響(xiang)。當實驗(yan)出現細胞(bao)生(sheng)長(chang)異常或(huo)微生(sheng)物代(dai)謝(xie)紊亂(luan)時，首先(xian)需(xu)排(pai)查(zha)氧氣濃度(du)參(can)數(shu)是(shi)否漂移，可(ke)通(tong)過外接高(gao)精度(du)氧氣分析儀進(jin)行比對(dui)校(xiao)準，確保(bao)調控(kong)系統(tong)的(de)精(jing)準(zhun)性。

 

　　低氧(yang)細胞(bao)微生(sheng)物培(pei)養(yang)箱的(de)氧氣濃度(du)調控(kong)是(shi)壹(yi)項(xiang)系統(tong)性工(gong)作(zuo)，需(xu)結(jie)合(he)實驗(yan)對(dui)象(xiang)特(te)性、設(she)備原(yuan)理(li)及(ji)操(cao)作(zuo)規範進(jin)行科(ke)學(xue)設(she)置(zhi)。只(zhi)有(you)實現參(can)數(shu)的(de)精(jing)準(zhun)、穩(wen)定(ding)控制，才(cai)能(neng)為細(xi)胞(bao)生(sheng)物學(xue)和(he)微生(sheng)物學(xue)研(yan)究提(ti)供(gong)可(ke)靠的(de)實驗(yan)環境，推動相(xiang)關領(ling)域(yu)的(de)研(yan)究進(jin)展。